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[发明专利]新疆野扁桃酵母双杂交质粒的构建方法-CN201610597749.8在审
发明人：曾斌;关鹏;刘梦雯;王建友;夏江宏 -专利权人：新疆农业大学
申请日： 2016-07-27 - 公布日： 2016-09-21 - 主分类号： C12N15/81 文献下载
摘要：本发明涉及一种新疆野扁桃酵母双杂交质粒的构建方法，该方法将花粉自交不亲和决定因子编码基因SFB插入酵母双杂交质粒pGBKT7，将花柱自交不亲和决定因子编码基因S‑RNase插入酵母双杂交质粒目前尚无针对新疆野扁桃自交不亲和性决定因子间相互作用的研究，我们首次构建了新疆野扁桃酵母双杂交质粒，所构建质粒适用于新疆野扁桃的酵母双杂交分子互作实验。
新疆扁桃酵母双杂交质粒构建方法

[发明专利]一种羊皮肤组织酵母cDNA文库及其构建方法-CN201811555952.4在审
发明人：李有文;张雪萍;米丽开姆·托合提尼亚改;童建军;何川川 -专利权人：塔里木大学
申请日： 2018-12-19 - 公布日： 2019-04-26 - 主分类号： C40B50/06 文献下载
摘要：本发明公开了一种羊皮肤组织酵母cDNA文库及其构建方法，涉及生物技术领域。本发明方法包括：提取羊痘病羊皮组织总RNA；从所述总RNA中分离出mRNA；构建酵母双杂交文库；鉴定所述酵母双杂交文库的质量；提取所述酵母双杂交文库的质粒，并将文库保存。本发明提取的文库质粒可直接用于酵母文库筛选；本发明通过上述方法建立了羊皮肤组织酵母cDNA文库，为以后研究羊痘病病例提供科学依据。
酵母双杂交文库皮肤组织构建酵母总RNA 生物技术领域病例提供酵母文库文库质粒羊皮质粒文库筛选保存研究

[发明专利]一种基于膜体系-酵母双杂交发现膜蛋白的方法-CN202111349955.4在审
发明人：朱也 -专利权人：南京瑞源生物技术有限公司
申请日： 2021-11-15 - 公布日： 2022-03-22 - 主分类号： C12N15/81 文献下载
摘要：本发明涉及膜蛋白实验技术领域，且公开了一种基于膜体系‑酵母双杂交发现膜蛋白的方法，一种基于膜体系‑酵母双杂交发现膜蛋白的方法，包括以下材料诱饵克隆：pBT3‑STE‑A、诱饵载体：pBT3‑STE、文库酵母质粒：草膜文库、Clontech酵母双杂交系统、培养基、贮备液。该基于膜体系‑酵母双杂交发现膜蛋白的方法，通过将诱饵质粒转化受体菌NMY51中及其自激活检测、文库筛选、筛库结果、酵母阳性克隆鉴定及测序比对与测序比对结果、酵母阳性克隆鉴定及测序比对与测序比对结果、酵母阳性克隆回转验证等步骤，通过酵母阳性克隆回转验证将筛选得到的34个酵母阳性克隆，均能在SD‑TL、SD‑TLH+30mM 3AT、SD‑TLHA+30mM 3AT缺陷性平板上生长，从而得到最终的膜蛋白，解决了与pBT3‑STE‑A
一种基于体系酵母双杂交发现膜蛋白方法

[发明专利]一种双杂交酵母及检测环境污染物类/抗盐皮质激素活性的方法-CN201810959691.6有效
发明人：张剑云;刘璟 -专利权人：浙江大学
申请日： 2018-08-17 - 公布日： 2020-10-30 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明公开一种双杂交酵母及检测环境污染物类/抗盐皮质激素作用的方法，(1)构建含有pGBKT7‑MR酵母表达质粒和pGADT7‑TIF2酵母表达质粒的双杂交酵母；(2)将所得双杂交酵母与盐皮质激素标准品共培养，检测报告基因表达的酶的酶活性，以酶活性对盐皮质激素标准品浓度绘制标准曲线；(3)相同条件下将待测环境污染物与所得双杂交酵母共培养，将所得酶活性带入所述标准曲线中，计算所得的盐皮质激素标准品剂量即为环境污染物的类盐皮质激素剂量本发明的目的在于构建一种能同时表达盐皮质激素受体和受体共激活因子的双杂交酵母，并在此基础上建立一种快速、经济的检测环境污染物对盐皮质激素受体干扰活性的生物测试方法。
一种双杂交酵母检测环境污染物类皮质激素活性方法

[发明专利]一种高效的酵母双杂交三框文库构建技术-CN202011504232.2在审
发明人：李昆鹏;李敏 -专利权人：武汉金开瑞生物工程有限公司
申请日： 2020-12-17 - 公布日： 2021-03-30 - 主分类号： C12N15/81 文献下载
摘要：本发明涉及一种高效的酵母双杂交三框文库构建技术，包括用于高效酵母双杂交三框文库构建的重组载体，所述重组载体有三种，所述三种重组载体是在原始PGADT7载体分别插入碱基序列1、碱基序列2和碱基序列3构建而成还包括上述载体的构建方法及利用上述载体构建酵母双杂交三框文库的构建方法。本发明通过重组载体构建酵母双杂交三框文库，能够有效降低假阴性率，并且成本较为低廉。
一种高效酵母双杂交文库构建技术

[发明专利]基于酵母双杂交系统验证连翘FsWRKY4/FsMAPK3蛋白互作的方法-CN202310019862.8在审
发明人：侯典云;张佳琪;吕淑芳;郭菡;刘浩;王婷 -专利权人：河南科技大学
申请日： 2023-01-06 - 公布日： 2023-04-25 - 主分类号： C12N15/81 文献下载
摘要：本发明涉及基于酵母双杂交系统验证连翘FsWRKY4/FsMAPK3蛋白互作的方法，即通过酵母双杂交验证两蛋白互作，过程为：克隆获得连翘FsWRKY4、FsMAPK3基因序列，并通过一步克隆法构建酵母双杂交猎物载体pGADT7‑FsWRKY4、随后进行酵母毒性检测和酵母自激活检测，最后通过酵母双杂交验证连翘FsWRKY4/FsMAPK3蛋白互作，可为中药材连翘提供丰富基因资源，为深入研究WRKY转录因子调控次生代谢物合成途径的分子机制以及分子植物育种提供有益参考
基于酵母双杂交系统验证连翘 fswrky4 fsmapk3 蛋白方法

[发明专利]酵母双杂交载体、构建方法及其在蛋白互作中的应用-CN201911243165.0在审
发明人：言普;沈文涛;庹德财;黎小瑛;周鹏 -专利权人：中国热带农业科学院热带生物技术研究所
申请日： 2019-12-06 - 公布日： 2020-03-06 - 主分类号： C12N15/81 文献下载
摘要：本发明涉及生物技术领域，特别涉及酵母双杂交载体、构建方法及其在蛋白互作中的应用。该酵母双杂交载体包括：pNC‑GADT7载体和pNC‑GBKT7载体；所述pNC‑GADT7载体于pGADT7载体的克隆位点处插入Nimble Cloning克隆框；所述pNC‑GBKT7载体于pGBKT7该Nimble Cloning的酵母双杂交载体，以方便目标基因克隆到载体。具有操作简单、克隆效率高、可标准化克隆等优点。
酵母双杂交载体构建方法及其蛋白中的应用

[发明专利]用于高通量酵母双杂交技术的重组载体及其大规模筛选互作蛋白的方法-CN201610436290.3有效
发明人：曹罡;杨芳;周美玲;雷莹莹;姚琪利;韩以超;朱成航;伍享;戴金霞;宋云峰;陈西;曾思华;傅振芳 -专利权人：华中农业大学
申请日： 2016-06-17 - 公布日： 2019-07-05 - 主分类号： C12N15/81 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于酵母双杂交的相关重组载体及其利用高通量测序技术大规模筛选互作蛋白的酵母双杂交的方法，该方法依赖于一种整合酶Integrase phiC31(En)的特有整合功能，通过对传统酵母双杂交载体的改造，使其与高通量测序技术有机结合，实现成百上千的Bait蛋白同时对Prey蛋白文库的筛选工作。将整合酶及其特异识别的核苷酸序列插入Matchmaker GAL4系统的载体中，通过酵母双杂交的方法使重组载体进入同一个酵母细胞，整合酶发生作用，将其特异识别的核苷酸序列及其紧邻的核苷酸序列进行特异性定向重排
用于通量酵母双杂交技术重组载体及其大规模筛选蛋白方法

[发明专利]一种新的酵母双杂交方法及其应用-CN201110113663.0无效
发明人：周荣家;程汉华;陈述亮 -专利权人：武汉大学
申请日： 2011-05-04 - 公布日： 2011-10-19 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明公开了一种新的的酵母双杂交方法，该方法通过降低低丰度基因丢失率的文库扩增、酵母菌快速转化质粒、逐渐提高选择压筛选蛋白质互作并判断相互作用的强弱程度和富集表达β-半乳糖苷酶而发现弱互作的蛋白质。本方法操作简单，假阳性和假阴性少，采用本系统的酵母双杂交方法，不仅能够发现新的相互作用蛋白质，而且能够筛选到已知的阳性克隆。本发明公开的酵母双杂交方法可用于基因的新功能分析和相互作用网络图谱的绘制。
一种酵母双杂交方法及其应用

[发明专利]用于cDNA文库构建筛选的质粒载体及其构建方法与应用-CN201410058679.X无效
发明人：崔晓艳;陈新;智海剑;顾和平;袁星星;张红梅;陈华涛 -专利权人：江苏省农业科学院
申请日： 2014-02-21 - 公布日： 2014-06-11 - 主分类号： C12N15/63 文献下载
摘要：本发明提供了一种能用于构建cDNA文库筛选的质粒载体及其构建方法与应用，在本发明中，膜蛋白与寄主互作最有效的方法是利用泛素介导的膜蛋白酵母双杂交系统，而构建cDNA文库较为简便快捷的方法是Gateway本发明通过将膜蛋白酵母双杂交系统与Gateway系统相融合，以载体pPR3-N为模板，用酶切连接的方法引入attR1-Cm^r-ccdB-attR2基因，改造成可用Gateway技术高效构建cDNA文库的pPR3-gateway载体质粒，该pPR3-gateway载体用于全长cDNA的定向克隆、文库构建和测序，或者用于酵母双杂交的文库筛选。
用于 cdna 文库构建筛选质粒载体及其方法应用

[发明专利]酵母双杂交质粒的构建方法-CN201010553950.9无效
发明人：华修国;沈权;崔立;张文 -专利权人：上海交通大学
申请日： 2010-11-23 - 公布日： 2011-05-18 - 主分类号： C12N15/81 文献下载
摘要：一种生物工程技术领域的酵母双杂交质粒的构建方法，以戊型肝炎病毒基因组RNA为模板设计引物并采用RT-nPCR方法扩增；将扩增产物进行双酶切，将双酶切得到的如Seq ID No.1所示的DNA片段插入pSOS质粒得到重组载体；制备酵母感受态细胞，在酵母感受态细胞中加入重组载体以及肝cDNA文库质粒DNA，经培养后筛选阳性酵母克隆；提取阳性酵母克隆中的质粒并转入大肠杆菌感受态细胞，筛选文库质粒后得到酵母双杂交质粒
酵母双杂交质粒构建方法

[发明专利]一种酵母双杂交筛选多肽文库的实验方法-CN202210334042.3在审
发明人：朱也 -专利权人：南京瑞源生物技术有限公司
申请日： 2022-03-30 - 公布日： 2022-08-05 - 主分类号： C12N15/81 文献下载
摘要：本发明涉及发酵酵母筛选基因技术领域，且公开了一种酵母双杂交筛选多肽文库的实验方法，包括材料的准备，所述材料的准备包含有诱饵克隆pGBKT7‑gA9‑nosc‑221、诱饵载体pGBKT7、文库酵母质粒pGADT7‑多肽cDNA、Clontech酵母双杂交系统、培养基的准备，所述培养基的准备包含有大肠杆菌培养基、酵母完全培养基、酵母缺陷型筛选培养基以及其他贮备液。具体包含将诱饵质粒转化受体菌AH109中及其自激活检测、文库筛选、酵母阳性克隆鉴定及测序比对、酵母阳性克隆回转验证，以构建到pGBKT7载体上的gA9‑nosc‑221基因为诱饵，筛选酵母双杂交多肽文库
一种酵母双杂交筛选多肽文库实验方法

[发明专利]一种转基因植物分子水平非预期效应评价的方法-CN201110104793.8有效
发明人：王戎疆;许崇任;韩娟;甄刚 -专利权人：北京大学
申请日： 2011-04-26 - 公布日： 2011-11-23 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明提供了一种基于酵母双杂交技术的转基因植物分子水平非预期效应评价的方法。将外源目的蛋白构建为诱饵融合蛋白，再将转基因植物受体亲本的cDNA文库构建猎物融合蛋白，通过酵母双杂交的方法用诱饵融合蛋白对猎物融合蛋白文库进行筛选，获得与外源目的蛋白相互作用的阳性作用子，从而实现对转基因植物分子水平的非预期效应的评价
一种转基因植物分子水平预期效应评价方法

[发明专利]一种检测雌激素或类雌激素化合物浓度的方法-CN201510025917.1有效
发明人：王子健;杨蓉;李娜;饶凯锋;马梅 -专利权人：中国科学院生态环境研究中心
申请日： 2015-01-19 - 公布日： 2017-07-28 - 主分类号： G01N33/74 文献下载
摘要：本发明公开一种检测样品中具有雌激素效应的化合物浓度的方法，包括如下步骤(1)建立雌激素化合物的浓度—雌激素效应关系曲线，包括如下步骤A1、制备双杂交酵母菌处于对数生长期的双杂交酵母菌液。本发明为环境混合污染物的毒性检测和风险评估提供了可靠的技术手段。
一种检测雌激素化合物浓度方法

[发明专利]一种重组稀有鮈鲫雌激素受体双杂交酵母gERβ1-GRIP1及其应用-CN201510098247.6在审
发明人：王子健;杨明嘉;韦玉梅;马梅 -专利权人：中国科学院生态环境研究中心
申请日： 2015-03-05 - 公布日： 2015-06-17 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明公开了一种重组稀有鮈鲫雌激素受体双杂交酵母gERβ1-GRIP1及其应用。本发明公开一种双杂交酵母，包括将含有稀有鮈鲫雌激素受体β1的配体结合域与DNA结合结构域的融合蛋白的编码基因和含有雌激素受体共激活因子与转录激活结构域的融合蛋白的编码基因导入基因型为MATα,ura 3-5,ade 2-101 trp 1-901,leu2-3,112,gal4△,met-,gal80△,URA::GAL1UAS-GAL1TATA-Luc的荧光酵母中得到双杂交酵母。
一种重组稀有雌激素受体双杂交酵母 ger grip1 及其应用

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